Здравствуйте, гость ( Вход | Регистрация )

Форум судебных медиков России
>

Выделение ДНК из гистологических срезов, нужна помощь!

>
MedGen
сообщение 30.07.2010 - 15:07
Сообщение #1


Вновь прибывший

Группа: Участники
Регистрация: 30.07.2010
Пользователь №: 22 383


Здравствуйте. Очень нужна помощь. Проблема в следующем: имеются гистологические срезы, заключенные между предметным и покровным стеклами. Нужно выделить из этих срезов ДНК с целью выявления точковых мутаций (ПЦР, секвенирование). Кто-нибудь сталкивался с такой задачей? Как можно сделать это с минимальными потерями биологического материала? можно ли как-то оптимизировать под это дело протокол фенол-хлороформной экстракции и как лучше всего отделить стекла друг от друга и сам срез от стекла? unsure.gif

Сообщение отредактировал MedGen - 30.07.2010 - 15:08
Пользователь offline
К началу страницы
+Ответить с цитированием
 
>   Ответов >
MedGen
сообщение 31.07.2010 - 10:42
Сообщение #2


Вновь прибывший

Группа: Участники
Регистрация: 30.07.2010
Пользователь №: 22 383


Зубр, спасибо за советы. у меня, если честно, тоже была такая мысль - соскоблить покровное стекло вместе с образцом и выделять из толченого стекла))) какая окраска и какие органы на срезах не ясно, т.к. стекла пришли из другого города без всяких сопровождающих бумажек. про загрязнение образца побочным человеческим материалом - мне кажется, в нашем случае это очень вероятно sad.gif хотя, если искать конкретную точковую мутацию, на сиквенсе она определяется, если она присутствует как минимум 20% ДНК-копий, если мне не изменяет мой склероз, конечно))))
будем пробовать разные варианты unsure.gif
Пользователь offline
К началу страницы
+Ответить с цитированием
Доктор Немо
сообщение 3.11.2011 - 20:31
Сообщение #3


Мастер I

Группа: СМЭ
Регистрация: 13.10.2008
Пользователь №: 10 234


Цитата(MedGen @ 31.07.2010 - 12:42)
какая окраска и какие органы на срезах не ясно, т.к. стекла пришли из другого города без всяких сопровождающих бумажек.

Если Вам это важно - покажите стекла любому гистологу
Он сразу скажет, что это за орган и что это за окраска
Пользователь offline
К началу страницы
+Ответить с цитированием

>   Сообщений в этой теме >
MedGen   Выделение ДНК из гистологических срезов   30.07.2010 - 15:07
savskaya2   Здрасьте, здрасьте. Сталкивались с этой задачей - ...   30.07.2010 - 21:26
MedGen   Да из блоков я выделяю фенолом, дело в том, что кр...   31.07.2010 - 00:50
Зубр   Да из блоков я выделяю фенолом, дело в том, что кр...   31.07.2010 - 08:48
Lady   Как Вы собираетесь выделять ДНК - как блоки станда...   26.10.2011 - 17:47
Зубр   Доброго времени суток, уважаемая 'Lady'...   27.10.2011 - 22:18
MedGen   Зубр, спасибо за советы. у меня, если честно, тоже...   31.07.2010 - 10:42
Зубр   ...какая окраска и какие органы на срезах не ясно,...   31.07.2010 - 12:44
MedGen   Зубр, спасибо Вам большое!!! :)   31.07.2010 - 20:33
Доктор Немо   какая окраска и какие органы на срезах не ясно, т...   3.11.2011 - 20:31
Unior   Если Вам это важно - покажите стекла любому гистол...   3.11.2011 - 21:19
Наталья   Уважаемый Зубр! Если кусочки вырезают через 1...   27.10.2011 - 22:33
Зубр   Уважаемый Зубр! Если кусочки вырезают через 1-...   27.10.2011 - 22:41
Unior   Добрый, э-э-э, Здравствуйте! Разрешите вставит...   27.10.2011 - 22:46
someone   Куриная ДНК к счастью человеческими праймерами не ...   27.10.2011 - 23:19
щепа   Куриная ДНК к счастью человеческими праймерами не ...   3.11.2011 - 21:20
Gordiz   Знаете в чем весь прикол, например, в нашей област...   3.11.2011 - 23:54
Зубр   Знаете в чем весь прикол, например, в нашей област...   4.11.2011 - 10:23
щепа   Поэтому, в частности, стараюсь отказаться от анали...   4.11.2011 - 18:24
alex-lab   Есть коммерческий набор, который разработан специа...   3.11.2011 - 10:41
Unior   Ну, типа, сарказм. Я своего генетика только на соб...   3.11.2011 - 21:23
someone   Так вот оно в чем дело :)   4.11.2011 - 09:57
profgenik9a   Уважаемый Зубр. За свой недолгий век в генетике оп...   19.02.2012 - 12:25
Зубр   Уважаемый Зубр. За свой недолгий век в генетике оп...   20.02.2012 - 06:57
profgenik9a   Благодарю.   20.02.2012 - 16:31



- Обратная связь Сейчас: 22.01.2025 - 07:57