Здравствуйте, гость ( Вход | Регистрация )
Выделение ДНК из гистологических срезов, нужна помощь! |
MedGen |
30.07.2010 - 15:07
Сообщение
#1 |
Вновь прибывший Группа: Участники Регистрация: 30.07.2010 Пользователь №: 22 383 |
Здравствуйте. Очень нужна помощь. Проблема в следующем: имеются гистологические срезы, заключенные между предметным и покровным стеклами. Нужно выделить из этих срезов ДНК с целью выявления точковых мутаций (ПЦР, секвенирование). Кто-нибудь сталкивался с такой задачей? Как можно сделать это с минимальными потерями биологического материала? можно ли как-то оптимизировать под это дело протокол фенол-хлороформной экстракции и как лучше всего отделить стекла друг от друга и сам срез от стекла?
|
Ответов |
MedGen |
31.07.2010 - 10:42
Сообщение
#2 |
Вновь прибывший Группа: Участники Регистрация: 30.07.2010 Пользователь №: 22 383 |
Зубр, спасибо за советы. у меня, если честно, тоже была такая мысль - соскоблить покровное стекло вместе с образцом и выделять из толченого стекла))) какая окраска и какие органы на срезах не ясно, т.к. стекла пришли из другого города без всяких сопровождающих бумажек. про загрязнение образца побочным человеческим материалом - мне кажется, в нашем случае это очень вероятно хотя, если искать конкретную точковую мутацию, на сиквенсе она определяется, если она присутствует как минимум 20% ДНК-копий, если мне не изменяет мой склероз, конечно))))
будем пробовать разные варианты |
Доктор Немо |
3.11.2011 - 20:31
Сообщение
#3 |
Мастер I Группа: СМЭ Регистрация: 13.10.2008 Пользователь №: 10 234 |
|
Сообщений в этой теме |
Сейчас: 22.01.2025 - 07:57 |