Здравствуйте, гость ( Вход | Регистрация )
![]() |
![]() |
![]() |
![]() |
![]() ![]() |
![]() |
SOS! ткани после формалина, методика приготовления буфера для уменьшения влияния формальдегида на |
![]() |
genetics |
![]()
Сообщение
#1 |
Читатель ![]() ![]() Группа: Участники Регистрация: 5.04.2014 Пользователь №: 39 269 ![]() |
Коллеги, помогите, пожалуйста, советом!
Пришли на повторную экспертизу три фрагмента мягких тканей (после формалина). Головой понимаю, что не получится просто по протоколу нарезать и выделить, так как формальдегид будет препятствовать получению впоследствии амплификатов. Собственно, у коллег до меня так и случилось. Прочитала статью о том, что такие объекты сначала вымачиваются в буфере с глицином 3 суток, а уже потом выделяется ДНК. Заранее спасибо! |
![]() |
![]() |
genetics |
![]()
Сообщение
#2 |
Читатель ![]() ![]() Группа: Участники Регистрация: 5.04.2014 Пользователь №: 39 269 ![]() |
Коллеги, помогите, пожалуйста, советом! Пришли на повторную экспертизу три фрагмента мягких тканей (после формалина). Головой понимаю, что не получится просто по протоколу нарезать и выделить, так как формальдегид будет препятствовать получению впоследствии амплификатов. Собственно, у коллег до меня так и случилось. Прочитала статью о том, что такие объекты сначала вымачиваются в буфере с глицином 3 суток, а уже потом выделяется ДНК. Заранее спасибо! Вопрос снят. Нашла пропись раствора. 100mM глицина, 10mM трис-HCl pH 8.0, 1mM ЭДТА |
![]() |
![]() |
Зубр |
![]()
Сообщение
#3 |
Магистр форума ![]() Группа: Модераторы Регистрация: 9.04.2007 Пользователь №: 4 766 ![]() |
Вопрос снят. Нашла пропись раствора. 100mM глицина, 10mM трис-HCl pH 8.0, 1mM ЭДТА Доброго времени суток! Более подробная методика в прикреплённом файле. ![]() |
![]() |
![]() |
genetics |
![]()
Сообщение
#4 |
Читатель ![]() ![]() Группа: Участники Регистрация: 5.04.2014 Пользователь №: 39 269 ![]() |
Доброго времени суток! Более подробная методика в прикреплённом файле. ![]() Да, спасибо, по этой методике и делала. К сожалению, чуда не случилось. Деградация она такая... |
![]() |
![]() |
Зубр |
![]()
Сообщение
#5 |
Магистр форума ![]() Группа: Модераторы Регистрация: 9.04.2007 Пользователь №: 4 766 ![]() |
Да, спасибо, по этой методике и делала. К сожалению, чуда не случилось. Деградация она такая... Методика подготовки/восстановления ДНК из тканей находившихся в формалине - это только первая часть решения задачи. Дальше этап генотипирования, который обычными средствами выполнить затруднительно. Нужны сверхкороткие фрагменты амплификации. То есть, индивидуальные условия для решения специфической задачи. Ну так, немного потеоретизировал. ![]() |
![]() |
![]() |
![]() ![]() |
![]() |
Сейчас: 4.04.2025 - 16:00 |